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Curricular Internship in Assisted Human Reproduction: Impact of Used Techniques on Sperm Quality Parameters.
Estágio Curricular Em Reprodução Humana Assistida: Impacto Das Técnicas Utilizadas Nos Parâmetros De Qualidade Espermática.
Vieira, Beatriz1,2
1) Department of Biology, Faculty of Sciences fo the University of Porto, Porto, Portugal; 2) CETI-Centro de Estudo e Tratamento da Infertilidade, Porto, Portugal.
Filmed:
2020-11-05
Submitted:
2020-11-19
Published:
2020-12-10
CHAPTERS
ANCORA
CITATION
Vieira, B. (2020, November 24). Curricular Internship in Assisted Human Reproduction: Impact of Used Techniques on Sperm Quality Parameters [Master’s dissertation, University of Porto] . https://academy-on.com/videos/vieira-beatriz-n-2-2020
ANCORA
SYNOPSIS
Lately the Reproductive Medicine has registered a quite remarkable technical-scientific evolution, which has allowed the development of various resources for the study and treatment of infertility and sterility. Currently, one of the most relevant issues and the subject of many studies is related to the manipulation of male gametes and the respective damage caused at the molecular level, namely in the sperm DNA fragmentation. Several studies indicate that sperm DNA fragmentation has a strong impact on male fertility, however, in a clinical context, the study of sperm DNA fragmentation is still poorly applied. This reduced applicability is due, in large part, to the high costs and the technical requirement for the evaluation of this parameter, which makes its application unfeasible. Therefore, it is essential not only the optimization of low-cost techniques for the evaluation of sperm DNA fragmentation but also the study and optimization of laboratory techniques performed in a clinical context, in order to obtain higher success rates in PMA treatments performed.
Nos últimos anos a Medicina da Reprodução tem vindo a registar uma evolução técnico-científica bastante notável, o que permitiu o desenvolvimento de variados recursos para o estudo e tratamento da infertilidade e esterilidade. Atualmente, uma das questões de maior relevância e alvo de maior estudo está relacionada com a manipulação dos gâmetas masculinos e os respetivos danos causados a nível molecular, nomeadamente na fragmentação do ADN espermático. Vários estudos indicam que a fragmentação do ADN espermático apresenta um forte impacto na fertilidade masculina. Contudo, em contexto clínico o estudo da fragmentação do ADN espermático ainda é parcamente aplicado. Esta reduzida aplicabilidade deve-se, em grande parte, aos elevados custos e à exigência técnica para a avaliação deste parâmetro, o que torna inviável a sua realização.Desta forma, mostra-se fundamental não só a otimização de técnicas de baixo custo para avaliação da fragmentação do ADN espermático, como também o estudo e otimização de técnicas laboratoriais realizadas em contexto clínico, de forma a obter maiores taxas de sucesso nos tratamentos de PMA realizados.
ANCORA
ABSTRACT
The last 40 years were remarkable regarding technical-scientific evolution in Reproductive Medicine’s field, which has contributed to the current availability of many resources for the study and treatment of infertility and sterility.During this internship in Assisted Reproductive Technology (ART), the work performed at CETI’s laboratory was followed carefully, to understand and integrate the laboratory routine of this institution, from sperm study to embryo transfer and cryopreservation. Thus, this first training proposal allowed the acquisition of theoretical and practical professional skills needed for an excellent performance in any andrology/embryology laboratory in the future.As a complementary training, a research project was developed, focused on the impact of the use of different commercial culture media and sperm cryopreservation media on sperm quality parameters. The integrity and packaging of sperm DNA were also evaluated by the Toluidine Blue (TB) staining technique.The evolutionary trend in ART treatments has been converging on solutions that increasingly mimic what happens in vivo, aiming to cause the least possible damage to gametes and embryos. However, this impact will hardly be nullified, so there will always be this disadvantage associated with ART, requiring constant optimization of the protocols used. One of the most important problems has been the manipulation of male gametes and damage caused by sperm DNA fragmentation.There is already evidence of the impact of sperm DNA fragmentation on fertility, although its study is still poorly applied in the clinical context of ART. This low applicability is mainly due to the high costs and the technical requirements for the evaluation of this parameter. With the emergence of new and more cost-effective methods of analysis with proven results, new perspectives for changing this paradigm emerge. Thus, optimization of protocols using these techniques, such as TB staining, is hugely relevant to evaluate sperm DNA fragmentation of different samples and also to study its applicability to predict ART procedures outcomes.
Os últimos 40 anos registaram uma evolução técnico-científica notável na Medicina da Reprodução, algo que contribuiu para a atual disponibilidade de diversos recursos para o estudo e tratamento de situações de infertilidade e esterilidade.Durante a realização deste estágio em Procriação Medicamente Assistida (PMA), acompanhou-se permanentemente os trabalhos executados no laboratório do Centro de Estudo e Tratamento da Infertilidade, de modo a compreender e integrar a rotina laboratorial desta instituição, desde o estudo do espermograma até à transferência e criopreservação dos embriões. Desta forma, esta primeira proposta de formação, permitiu a aquisição de competências profissionais teóricas e práticas necessárias para um bom desempenho em qualquer laboratório de andrologia/embriologia no futuro.Como formação complementar, desenvolveu-se um projeto de investigação focado no estudo do impacto da utilização de diferentes meios comerciais de cultura e de criopreservação de espermatozoides, nos parâmetros de qualidade dos mesmos. Avaliou-se também a integridade ao nível da fragmentação e compactação do ADN dos espermatozoides, através da técnica de coloração com Toluidine Blue (TB).A tendência de evolução nos tratamentos de PMA tem vindo a convergir em soluções que mimetizem cada vez mais o que ocorre in vivo, para que causem o menor dano possível nos gâmetas e nos embriões. No entanto, esse impacto dificilmente será anulado, pelo que, haverá sempre esta desvantagem associada à PMA, sendo necessária uma constante otimização dos protocolos utilizados. Um dos problemas que tem vindo a demonstrar-se de extrema relevância está relacionado com a manipulação de gâmetas masculinos e os danos causados ao nível da fragmentação do ADN espermático.Existe já evidência do impacto da fragmentação do ADN de espermatozoides na fertilidade, embora seja um estudo ainda pouco aplicado no contexto clínico da PMA. Esta baixa aplicabilidade deve-se, em grande parte, aos elevados custos e à exigência técnica para a avaliação deste parâmetro. Com o aparecimento de novos métodos de análise mais económicos e com resultados comprovados, surgem novas perspetivas de mudança deste paradigma. Assim, torna-se extremamente relevante uma otimização de protocolos com recurso a estas técnicas, como por exemplo a marcação com TB, por forma a obter a percentagem de fragmentação no ADN espermático de diferentes amostras e estudar uma possível aplicabilidade como meio de prognóstico em tratamentos de PMA
ANCORA
KEYWORDS
Human spermatozoa, ART, cryopreservation, cell culture, Sperm DNA fragmentation, Toluidine Blue.
Espermatozoides humanos, PMA, Criopreservação, Cultura celular, Fragmentação de ADN espermático, Azul de toluidina.
ANCORA
DISCLOSURES
The author certifies that there is no actual or potential conflict of interest in relation to this video article.
ANCORA
REFERENCES
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